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        影響冷凍效果的因素

        時間:2020-05-18 09:20來源:未知 作者:班德液氮罐 點擊:
        降溫程序是決定冷凍效果的另一個關鍵因素。若降溫速度過快,細胞內部易形成冰晶對細胞造成損傷;若降溫速度過慢,會因細胞外部介質的水分結冰而導致細胞過度脫水死亡。因為-60~0℃的低溫對細胞的損傷最大,因此要選擇合適的降溫程序,讓細胞在能夠適應溫度驟變的前提下,迅速安全地通過這個溫度危險區,提高冷凍效果。根據研究的數據和相關報道,在精子超低溫冷凍前先于4℃平衡15~25min,再于距離液氮面15cm處停留5min,在距離液氮面5cm處停留10min,可使櫛江珧、近江牡蠣、馬氏珠母貝等精子冷凍效果達到最好。樣品體積對冷凍效果也有影響。樣品體積的不同可能影響了熱的交換,體積小的樣品降溫快,體積大的樣品降溫慢,這間接造成了降溫條件的差異,導致精子活率不一樣。關于雙殼類最適冷凍體積的探討,朱豪磊認為香港牡蠣在冷凍體積為0.75mL時復蘇效率最高;李純認為紫貽貝、櫛孔扇貝和菲律賓蛤仔的最適精子冷凍體積分別為0.4、1和1mL。有研究的數據顯示,櫛江珧和近江牡蠣精子在冷凍體積為1.0~1.4mL的范圍內保存效率最高。分析以上研究結果不同的原因,一方面是物種間的差異,更重要的是降溫程序存在差異??聛喎虻日J為,不同體積的樣品保存時要對應不同的降溫方法,以達到最適保存效果。所以,1.0~1.4mL的樣品體積最適合櫛江珧和近江牡蠣的研究結果,雙殼類精子的超低溫冷凍保存起始于20世紀70年代。液氮罐廠家

        雙殼類精子相對于絕大多數脊椎動物而言,體積小、細胞膜薄、細胞內水分少,這些特點非常有利于精子的超低溫冷凍保存。研究的數據顯示近江牡蠣低溫冷凍后精子活率略高于櫛江珧,這暗示著近江牡蠣精子較櫛江珧精子的抗低溫能力較強,可能更適合于精子冷凍保存工作的開展。與此相比,卵子的冷凍保藏技術相對滯后,卵子中存在的大量水分,在冷凍時易形成胞內冰晶而破壞細胞;卵內構成紡錘絲的微管對生化試劑非常敏感;超低溫冷凍易造成透明帶硬化或破裂,而形成多精受精,這些都是亟待解決的技術難題。精子和卵子超低溫保存技術相輔相成,方可有效地推動種質優化和資源保護。液氮罐廠家

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