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        液氮罐中的菌種活化

        時間:2020-03-13 09:24來源:未知 作者:班德液氮罐 點擊:
        液氮罐中的菌種(Bacterial species)活化是怎么回事?
          菌(fungus)種活化就是將保藏狀態的菌種放入適宜的培養基中培養, 逐級擴大培養是為了 得到純而壯的培養物,即獲得活力旺盛的、接種數量足夠的培養物。液氮罐一般可分為液氮貯存罐、液氮運輸罐兩種。 貯存罐主要用于室內液氮的靜置貯存,不宜在工作狀態下作遠距離運輸使用; 液氮罐為了滿足運輸的條件,作了專門的防震設計。其除可靜置貯存外,還可在充裝液氮狀態下,作運輸使用,但也應避免劇烈的碰撞和震動。液氮罐使用過程中要經常檢查??梢杂醚塾^測也可以用手觸摸外殼,若發現外表掛霜,應停止使用;特別是頸管內壁附霜結冰時不宜用小刀去刮,以防頸管內壁受到破壞,造成真空不良,而是應將液氮取出,讓其自然融化。菌種發酵又稱酦酵有一般需要 2-3 代的復壯過程,因為保存時的條件往往和培養時的條件不相同,所 以要活化,讓菌種逐漸適應培養環境(environment) 要明白菌種活化的情況就需要了解菌種保藏的方式和方法。
          目前國際(International)國內常用的 菌種保存方法包括(bāo kuò): 定期移植法、 液體石蠟法、 沙土管法、 真空冷凍干燥法、 80℃ 冰箱凍結法、液氮超低溫凍結法。
          對于不同的保存方式活化的方式也不同:
          1 定期移植法的菌種復蘇較簡單,直接轉接即可;
          2 液體石蠟法保存的菌種在復蘇時,挑取少量菌體轉接在適宜的新鮮培養基上, 生長繁殖(fán zhí)后,再重新轉接一次;
          3 沙土管法保存菌種(Bacterial species)在復蘇時,在無菌(意思:沒有活菌)條件下打開沙土管,取部分沙土粒于適 宜的斜面培養(to cultivate)基上, 長出菌落后再轉接一次。 或取沙土粒于適宜的液體(liquid)培養基中, 增殖培養后再轉接斜面;
          4 真空冷凍(freezing)干燥法保存菌種在復蘇時先用 70%酒精棉花擦拭安瓿上部,將安瓿 管頂部燒熱, 用無菌(意思:沒有活菌)棉簽沾冷水,在頂部擦一圈,頂部出現裂紋,用挫刀或鑷 子頸部輕叩一下,敲下已開裂的安瓿管的頂端,用無菌水或培養液溶解菌塊,使用(use)無菌吸管移入新鮮培養基上,進行適溫培養;
          5 -80℃ 冰箱凍結法保存菌種(Bacterial species)復蘇時,從冰箱中取出安瓿管或塑料凍存管,應 立即放置 38℃-40℃水浴中快速復蘇并適當快速搖動。直到內部結冰全部溶解為 止,約需 50 秒-100 秒。開啟安瓿管或塑料凍存管,將網站內容物移**適宜的培養基 上進行培養 6 液氮超低溫凍結法保存菌種復蘇與-80℃ 冰箱凍結法保存菌種復蘇相似,從液氮罐(Liquid)中取出安瓿管或塑料凍存管,應立即放置在 38℃-40℃水浴中快速復蘇并 適當搖動。直到內部結冰全部溶解為止,一般約需 50 秒-100 秒。開啟安瓿管或塑料凍存管,將內容物移**適宜的培養基上進行培養。
          總結一下菌種活化需要以下幾個步驟(procedure):
          **配置菌(fungus)種適宜生長(Grow)的培養基
          第二將菌(fungus)種從保藏狀態恢復到室溫狀態,比如將冷凍(freezing)的菌種解凍第三將通過操作將保藏的菌種接種到培養基中培養,此步驟稱為菌種復壯
          第四步挑選培養基茁壯的菌落,挑選其中部分菌落接種到新的培養基中培養,重復此步驟(procedure) 2-3 次,從而得到生長(Grow)良好的菌落
          經過這四個步驟就到達將菌種從保藏狀態活化的目的
          有同學已經說的很專業(zhuān yè)了,我就給你說些簡單實用的。不知道你出于何種目的要進行活化。 如果你是用凍存管保存的菌株進行活化, 取出 2 顆小珠放在適宜的固 體培養(to cultivate)基上,合上蓋讓小珠在平皿上滾動,適宜條件培養就可以了。長出一個菌 落,你再繁殖就可以了。如果你是凍干粉的菌種(Bacterial species),準備適宜的液體培養基,少少一點點粉末接種就可以了,根據此菌種一般液體培養所需時間,大概在 36-48h, 你還可以在觀察(Observed)到液體渾濁、試管底部有沉淀(precipitation)時(沉淀者也可能為原本死亡的細 菌),取 100 微升液體涂抹(smear)在固體培養基上。 一般的話,復蘇的菌種需要重復幾次復壯。

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